怎么样从牛奶中提取酪蛋白

利用等电点时溶解度最低的原理：

1、将牛乳的PH调到4、7时酪蛋白沉到最下面，最上边是脂肪可以用盐析法。

2、蛋白质沉淀后，离心10分钟，水洗两次，离心10分钟。

3、加入乙醇，搅拌，悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。

4、用乙醇和乙醚混合液清洗沉淀2次。

5、最后用乙醚清洗沉淀两次，抽干。

6、沉淀风干，得到酪蛋白。

酪蛋白的制备实验报告

实验5 酪蛋白的制备 一、目的1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。 二、原理牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。 三、材料、试剂与器具（一）材料 新鲜牛奶（一）试剂1、95%乙醇 1 200mL2、无水乙醚 1 200mL3、0.2mol/L pH4.7醋酸——醋酸钠缓冲液 300ml 先配A液与B液A液：0.2mol/L醋酸钠溶液 称NaAC·3H2O 54.44g，定容至2000ml。B液：0.2mol/L醋酸溶液，称优级纯醋酸（含量大于99.8%）12.0g定容至1000ml。取A液1770ml，B液1230ml混合即得Ph4.7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。4、乙醇——乙醚混合液 乙醇：乙醚=1 ：1（V/V）（二）器具1、离心机 2、抽滤装置3、精密pH试纸或酸度计 4、 电炉5、烧杯 6、温度计 四、操作步骤（一）酪蛋白的粗提100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7的醋酸缓冲液100mL.用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟（3000 r /min）。弃去清液，得酪蛋白粗制品。（二）酪蛋白的纯化1、用水洗涤沉淀 3次，离心10分钟（3 000r/min），弃去上清液。2、在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。3、将沉淀摊开在表面 上，风干；得酪蛋白纯品。（三）准确称重，计算含量和得率。含量：酪蛋白g/100 mL牛乳（g%） 式中理论含量为3.5g/100mL牛乳。

牛奶中提取酪蛋白的原理

原理：牛乳中主要蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的PH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂质杂质后便可得到纯酪蛋白。

试剂

牛奶 ，体积分数95%乙醇1200ml，无水乙醚1200ml，0.2mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲溶液3000ml（先配置A液和B液）

A液（0.2mol/L醋酸钠溶液）：称NaAc·3H2O 54.44g，定容2000ml

B液（0.2mol/L醋酸溶液）：称优级纯醋酸（含量大于99.8%）12g，定容至1000ml

取A液1770Ml，B液1230ml，混合既得PH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液3000ml

操作

1，将100ml牛奶加热至40℃，在搅拌下慢慢假如预热至40℃、PH4.7的醋酸缓冲溶液，用精密PH试纸或酸度计调PH至4.7。将上述悬浮液冷却至室温。离心15min(3000r/min)，弃去上清夜，得酪蛋白粗制品（或用细布过滤，收集沉淀）

2，用水洗沉淀3次，离心10min(3000r/min)，，弃去上清夜

3，在沉淀中加入30ml体积分数95%乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽虑，用乙醇-乙醚混合液（乙醇和乙醚按1：1等体积混合）2000ml洗沉淀2次，最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。

4，将沉淀摊开在表面皿上，风干，得酪蛋白纯品

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